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常見問題
常見問題
答：不同物種或品種的植物細(xì)胞在翻譯表達(dá)基因時(shí)，其表達(dá)模式和影響因子不同。建議實(shí)驗(yàn)時(shí)盡可能選用與目的基因來源相近的受體材料進(jìn)行表達(dá)。不同時(shí)間點(diǎn)取樣拍照，定位位置不同。活體細(xì)胞狀態(tài)下，某些蛋白有信號肽，會移動(dòng)。部分蛋白在特定條件（如缺氧）下會發(fā)生亞細(xì)胞定位改變，需查閱文獻(xiàn)確認(rèn)正常定位。GFP等標(biāo)記物融合位置（N端/C端）可能改變定位結(jié)果，需根據(jù)蛋白序列調(diào)整融合策略。有些預(yù)期不符的情況可能是由?儀器分辨率限制的，低分辨率儀器可能無法區(qū)分相鄰亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與細(xì)胞膜）；?熒光波長與儀器不匹配會導(dǎo)致信號檢測偏差，需更換標(biāo)記物或調(diào)整儀器設(shè)置。建議優(yōu)先排查實(shí)驗(yàn)操作問題，若仍無法解決則需考慮蛋白自身特性或物種差異。查閱數(shù)據(jù)庫信息或者參考文獻(xiàn)，明確靶蛋白的定位情況，設(shè)置空白對照。
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